“现在抽取3毫升溶剂。看准刻度，要准确。”卢俊嘉说，“针头插入溶剂液面下，缓慢拉动活塞……对，不要太快，避免吸入气泡。30毫升，正好。”

    陈航将注射器针头刺入schlenk管的橡胶隔垫，在氮气流保护下将dce注入反应管。白色粉末在清澈溶剂中逐渐溶解，溶液呈淡黄色。

    就在此时，实验室门被推开。

    马荣真教授走了进来，手里拿着笔记本，也不说话，拉过椅子坐下，目光投向通风橱。

    卢俊嘉稍微顿了顿，继续教学：“接下来是关键步骤，硝酸硝化。发烟硝酸，浓度98，腐蚀性极强，这一步必须万分小心。”

    陈航点头，从试剂架上取下棕色硝酸瓶。刺激性气味顿时弥漫开来。

    “硝酸密度151，我们要12当量，也就是12毫摩尔，算下来体积约005毫升。”卢俊嘉语速平缓，“这么小的体积很难准确量取，所以我们先配成10稀释溶液，取01毫升硝酸，用09毫升预冷无水乙腈稀释，再从中取05毫升使用。”

    陈航取出一支全新1毫升玻璃注射器，按卢俊嘉的指导先用氮气冲洗三次。

    “现在抽取01毫升硝酸。”卢俊嘉的声音变得格外认真，“针头插入液面下，缓慢拉动活塞。手要稳，眼睛看准刻度。”

    实验室里静得只剩下通风橱的低鸣。马荣真在后方坐着，目光如炬。

    陈航的手很稳。01毫升浅褐色液体被精准吸入注射器，没有一丝颤抖。

    “迅速注入预冷的乙腈中。”卢俊嘉指着一个小样品瓶，“瓶里已经有09毫升无水乙腈，放在冰浴里冷却过了。注入时慢一点，避免剧烈放热。”

    硝酸与乙腈混合，轻微摇晃后，得到淡黄色的10硝酸溶液。

    “现在从稀释液中抽取05毫升。”卢俊嘉继续指导，“这就是我们要用的硝化试剂量。”

    陈航换了一支新注射器，精准抽取05毫升。

    “好，现在滴加到反应体系中。”卢俊嘉说，“针头刺入橡胶隔垫，在搅拌下缓慢滴加。控制速度，一分钟约二十滴，让反应温度维持在零下十度左右。”

    陈航将反应管放入已经设置好-10°c的低温浴槽中，启动磁力搅拌，然后开始滴加。

    一滴、两滴、三滴……

    淡褐色硝酸溶液落入淡黄色反应液中，颜色立刻开始变化，淡黄变深黄，再转向橙黄。

    “看颜色变化。”卢俊嘉讲解道，“这是反应发生的直观标志。控制滴加速度，如果太快，放热会导致温度升高，可能引发环上硝化等副反应。”

    陈航全神贯注，右手拇指均匀地推动注射器活塞，左手扶着反应管保持稳定。

    马荣真在后面看着，偶尔在笔记本上记录什么。

    十五分钟后，滴加完成。陈航长出一口气，额头已经渗出细汗。

    “反应体系现在维持在-10°c，搅拌反应两小时。”卢俊嘉看了眼时间，“这段时间我们可以准备后处理用的试剂和器材。先配饱和氯化铵溶液，知道为什么用氯化铵而不是碳酸氢钠吗？”

    陈航一边称量氯化铵固体，一边回答：“硝酸是强酸需要中和，但碳酸氢钠碱性太强，可能破坏对碱敏感的n-硝基胺结构。氯化铵水溶液ph接近中性，更安全。”

    “正确。”卢俊嘉点头，“用冰水浴冷却，淬灭时需要低温。”

    两小时的等待时间里，卢俊嘉继续教学。

    “这是硅胶板，做薄层色谱用。”他拿起一块玻璃板，“点样要用毛细管，样品浓度1-5毫克每毫升比较合适。太稀斑点不明显，太浓会拖尾。”

    陈航已经将少量粗产物溶解，拿起一根毛细管。

    “点样点要小，直径不超过2毫米。”卢俊嘉指导道，“距离底板边缘至少1厘米。每个样点间距1厘米左右。”

    陈航小心点样，手很稳，六个样点整齐排列在起始线上。

    “现在展开剂，先用石油醚和乙酸乙酯9:1试试。”卢俊嘉配好展开剂，倒入展开缸，“把板子放进去，盖上盖子，等溶剂前沿爬到接近顶端。”

    等待展开的时间，马荣真突然开口：“卢俊嘉。”

    “马老师？”

    “如果产物在硅胶上有吸附，斑点拖尾严重，怎么处理？”

    卢俊嘉思考道：“可以加点三乙胺调节极性，或者换用氧化铝板……”

    “用05的乙酸乙酯胺溶液预饱和展开缸。”陈航同时开口，“或者在展开剂里加几滴三乙胺，中和硅胶表面的酸性位点。”

    实验室里安静了一秒。

    马荣真看着陈航，又问：“那如果产物紫外吸收很弱，显色不明显呢？”

    “可以用碘缸显色，或者喷洒硫酸-乙醇溶液后加热。”陈航回答，“如果是含氮化合物，也可以用硝酸铈铵试剂。”

    卢俊嘉感觉自己作为研究生的尊严正在被一个高中生按在地上摩擦。

    本小章还未完，请点击下一页继续阅读后面精彩内容！

    马荣真点点头，没再说话，但嘴角似乎动了动。

    两小时到了。陈航小心地将反应管从低温浴槽取出，溶液仍呈橙黄色，没有明显变化。

    “现在淬灭反应。”卢俊嘉恢复教学状态，“把反应液倒入冰浴冷却的饱和氯化铵溶液中，要慢，边倒边搅拌。”

    陈航照做。反应液与氯化铵溶液接触时发出轻微的“嘶嘶”声，冒出细小气泡。

    “中和放热，冰浴能控制温度。”卢俊嘉说，“等不再冒气泡，说明酸基本中和完了。现在用乙酸乙酯萃取，知道为什么用乙酸乙酯吗？”

    “乙酸乙酯对中等极性有机物溶解性好，与水不混溶，沸点适中便于后续旋蒸除去。”陈航一边将混合物转移进分液漏斗一边回答。

    “正确。加20毫升，盖上塞子，倒置，缓慢摇晃……对，然后小心放气。”卢俊嘉指导着每个细节，“萃取三次，合并有机相。”

    三次萃取后，陈航将合并的有机相倒入锥形瓶，加入无水硫酸钠干燥。

    “硫酸钠用量要合适，太少干燥不彻底，太多吸附产物。”卢俊嘉说，“加一小勺，摇晃，如果硫酸钠结块说明还有水分，再加一点。”

    陈航加入硫酸钠，摇晃后颗粒自由流动，没有结块。

    “干燥完成。现在过滤，旋蒸除去溶剂。”卢俊嘉递过折叠好的滤纸和漏斗。

    过滤，转移至圆底烧瓶，连接旋转蒸发仪。陈航设定水浴温度40°c，缓慢抽真空。溶剂在旋转的烧瓶内壁形成均匀液膜，迅速蒸发。

    五分钟后，烧瓶底部留下约008克浅黄色油状物。

    “粗产物。”卢俊嘉说，“现在柱层析纯化。柱子我已经装好了，200-300目硅胶，直径2厘米，高30厘米。你先检查装填是否均匀。”

    陈航用手电筒从侧面照射色谱柱，硅胶填充均匀，没有断层或气泡。

    “上样。用最少量的二氯甲烷溶解粗产物。”卢俊嘉递过一个小样品瓶，“溶解后，用滴管转移到柱子顶端，要慢，让样品在硅胶表面形成整齐的带。”

    陈航的操作虽不熟练但很仔细，淡黄色样品溶液在硅胶顶端形成了一个宽约15厘米的整齐色带。

    “好，现在洗脱。”卢俊嘉说，“先用纯石油醚冲一段，把极性最小的杂质洗下来。流速控制在每秒一滴左右。”

    清澈的石油醚缓缓流下。十分钟后，柱子顶端出现了一条淡黄色的色带，缓慢向下移动。

    “这是第一个组分，可能是原料或者极性很小的杂质。”卢俊嘉讲解道，“继续洗脱，等这个带出来，我们开始梯度增加乙酸乙酯比例。”

    第一个色带完全洗脱后，陈航按卢俊嘉指导，将洗脱剂改为石油醚:乙酸乙酯=95:5。

    “看，新的色带出现了，颜色更深，移动更慢。”卢俊嘉指着柱子，“这应该是目标产物，n-硝基-2-氨基吡啶极性比原料大，会在较高极性段洗脱。”

    陈航小心收集每一管洗脱液，同时点tlc监测。当乙酸乙酯比例增加到15时，tlc板上出现了一个新的斑点，rf值约03。

    “目标馏分，第10到14管。”陈航将这几管合并，再次旋蒸。

    得到约004克浅黄色固体。

    “产率约40。”陈航计算道，“第一次尝试，这个产率可以接受。”

    他将产物分装到两个样品瓶中：“一瓶送核磁，一瓶送质谱。”

    喜欢全能学霸人生请大家收藏：()全能学霸人生小说网更新速度全网最快。